CRISPR-Cas9基因編輯過程存在副作用，包括不需要的突變和細胞毒性。據10日發(fā)表在《自然·生物醫(yī)學工程》雜志上的論文，日本九州大學和名古屋大學醫(yī)學院的研究人員開發(fā)出一種優(yōu)化的基因組編輯方法，可極大地減少突變，從而更有效地治療遺傳疾病。

　　以CRISPR-Cas9為核心的基因組編輯技術的缺點之一是突變和脫靶效應。這通常是由于酶靶向具有與目標位點相似序列的基因組位點引起的。同樣，當基因改變時，會發(fā)生染色體水平的突變，這阻礙了癌癥基因治療的臨床試驗，甚至導致正在接受肌肉營養(yǎng)不良治療的患者死亡。研究小組假設，目前使用Cas9的編輯方案會導致DNA過度切割，從而導致一些突變。

　　為了驗證這一假設，研究小組在小鼠細胞中構建了一個名為“AIMS”的系統(tǒng)，該系統(tǒng)分別評估了每條染色體上Cas9的活性。結果表明，常用的方法具有非常高的編輯活躍度，這種高活躍度會導致一些副作用。他們發(fā)現(xiàn)，將額外的胞嘧啶延伸至gRNA的5'端是有效的，可有效抑制過度活躍，并允許控制DNA切割。

　　新技術減少了脫靶效應和細胞毒性，提高了單等位基因選擇性編輯的效率，并提高了DNA雙鏈斷裂修復最常用的同源定向修復機制的效率。

　　為了在醫(yī)學環(huán)境中測試其有效性，研究人員調查了一種名為進行性骨化性纖維發(fā)育不良的罕見疾病。使用小鼠模型，他們創(chuàng)造出與人類版本相同的基因。然后，使用患者來源的誘導性多能干細胞，他們能修復損傷，精確到導致疾病的相關等位基因中的單個核苷酸，這證明了該技術用于基因治療的安全性和有效性。

　　團隊還構建了各種基因組編輯模式與Cas9活性之間相關性的首個數學模型，使用戶能夠在整個細胞群體中模擬基因組編輯的結果。這一突破使研究人員能夠確定效率最大化的Cas9基因編輯過程，從而減少所需的巨大成本和勞動力。